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Gulliver Biomed

我們提供高品質的客製化駱駝類單域抗體(sdAbs,亦稱 VHHs 或奈米抗體)。我們擁有超過 25 年奈米抗體研發的專業經驗,能將其廣泛應用於各種生物與臨床領域。我們也提供自行開發的奈米抗體

免疫球蛋白 (IgG) 在研究、診斷與治療上扮演重要角色,但也存在數項缺點:

  • 蛋白質體積大 (150 kDa)、由四條胺基酸鏈組成,結構複雜。
  • 研究人員很少能取得其對應的 cDNA。
  • IgG 通常無法於細胞內使用(儘管細胞質中含有數千種蛋白質,卻缺乏相對應的特定抑制劑)。 
  • 將抗體與藥物、脂質、量子點、金奈米粒子等進行耦合的過程相當繁瑣,且需仰賴複雜的化學反應。

奈米抗體不會面臨上述問題。

駱駝類的重鏈抗體 (HcAbs) 最早於比利時布魯塞爾被發現(如下圖所示)。這類 HcAb 的抗原結合片段被稱為奈米抗體、VHH 或單域抗體。比利時是學術界與民間企業進行奈米抗體研究的重鎮。

  • 奈米抗體的體積約為 IgG 的十分之一,由單一胺基酸鏈組成,結構簡單。高親和力結合分子(單價形式下可達 nM 至 pM 等級)。
  • 奈米抗體的 cDNA 基本上皆可取得。
  • 奈米抗體在真核細胞的細胞質中具有穩定性,並可如同其他 cDNA 一般,經由嵌入表達載體後轉染至細胞內。
  • 奈米抗體可進行簡單、具部位特異性且可重現的衍生化修飾。
  • 奈米抗體如同分子聽診器,能掃描目標蛋白質 (POI) 表面並識別其關鍵表位。

傳統抗體、僅含重鏈的抗體 (HCAbs) 與奈米抗體 (Nbs) (A) HCAb(圖中間)僅由兩條重鏈組成。其抗原結合部位稱做 VHH,為一條約 120 個胺基酸組成的單一鏈 (15 kDa)。(B) 奈米抗體的 CDR(互補決定位,紅色)與 FR(框架區,藍色)。CDR 對抗原的結合非常重要,通常比 IgG 的同源區域更長,使奈米抗體能接觸到難以到達的表位,例如:酶的催化位點。

探索重組 15 kDa 高親和力 VHH/奈米抗體的多元應用潛力。

  • 在(生物)醫學、藥理學及其他領域皆有廣泛應用。
  • 主要特點:高度工程多樣性、卓越可控性、體積小、單域結構。各方面皆易於操作與管理。
  • 可在原核生物中實現無縫且具成本效益的表達,僅需簡單碳源,無需添加 FBS。
  • 奈米抗體可進行簡單的衍生化修飾,能與多種化學物質與生物製劑進行部位特異性的點擊化學反應。
  • 每個蛋白質皆為潛在的操控或藥物作用標的。
  • 奈米抗體是針對任何目標蛋白質進行藥物治療或作為 ADC 傳遞藥物的最快方式。
  • 為您的脂質奈米粒子 (LNP) 配備奈米抗體,賦予其前所未有的靶向能力。
  • 多模式目標調節功能:可阻斷、干擾、降解(參見 siRNA/shRNA)、成像、追蹤、結晶,或將目標蛋白質異位定位。只需一種工具即可實現!適用於體外與體內實驗。
  • 善用我們超過 25 年的經驗。

Gulliver 客製化服務

  • 客製化奈米抗體產生。
  • 奈米抗體庫建構。
  • 提供成果:奈米抗體 cDNA 複製、重組奈米抗體。
  • 奈米抗體修飾,用於與藥物、脂質奈米粒子 (LNP)、量子點以及磁珠耦聯。
  • 作業時程:6 週免疫 + 3 週後處理,cDNA 即可交付。

奈米抗體的多元應用領域

*健康與疾病相關的生物醫學研究

*更具成本效益且高靈敏度的診斷應用

*顯微鏡分析中的連結誤差極小

*細胞學應用:VHH 細胞內抗體

*CAR-T 應用:VHH 具備優異的溶解性

*VHH 基因治療應用(體積小巧)

*新型抗生素

*作物防護應用(真菌、線蟲、病毒、細菌)

*食品安全

*抗體藥物複合體

*脂質奈米粒子 (LNP) 上的定向裝置

*新增您的個人發現

針對您感興趣的目標蛋白質產製 VHH,全面提升您的研究潛力

將此技術納入您的下一份研究計畫申請中,或更進一步,立即與我們聯絡。我們將全程引導您完成流程,提供最新資訊,並在您取得目標 VHH 後持續協助後續應用。我們的學術團隊擁有超過二十年將 VHH 應用於研究中的實務經驗。

  • 如同操作其他 cDNA 一樣設計奈米抗體:將 VHH 複製至表達載體中,加入所需標記,接著可進行轉形、轉染、轉導、核轉染、電穿孔等步驟,將您的奈米抗體導入原核宿主或真核細胞中,並進一步調控抗原的特性。
  • 細胞層級實驗:無需將目標蛋白質 (POI) 製成 GFP 融合蛋白並過度表現,可透過將奈米抗體結合螢光蛋白,在活細胞中追蹤目標蛋白質
  • 目標蛋白質異位定位至其他胞器,如細胞核、線粒體、過氧化體與內質網等。
  • 透過蛋白酶體途徑進行降解,以達到目標蛋白質的細胞內清除(蛋白質敲除)。其突破性堪比 2001 年的 RNAi 技術。
  • 可使用 VHH 作為共晶化的伴護蛋白,以獲得表位界面的原子級解析資訊。這可作為透過藥物化學開發小分子抑制劑的起點。
  • 將 VHH 標記放射性核種,即可作為診斷工具或追蹤劑使用
  • 應用於蛋白質體學,進行互動夥伴的篩選或缺失分析(奈米抗體足跡)。
  • 透過插入非天然胺基酸,賦予 VHH 獨特的化學反應性 (如叠氮基苯丙胺酸,azido-Phe)。

無論您從事的是基礎或應用(生物)醫學、動物或植物科學、藥理學、病毒學、微生物學、(超分辨率)顯微鏡學、疫苗研究或漁業科學,VHH 都能為您帶來前所未有的機會,揭示傳統基因技術或傳統抗體無法獲取的生物或臨床資訊。原因在於,蛋白質是所有生物體的基本組成元件,並以最根本的方式參與健康與疾病的發展。

遺傳方法往往會使目標蛋白質的所有功能遭到移除,並摧毀其整體互作網路。蛋白質通常與許多其他蛋白質形成交互作用,彼此建構出支撐各種細胞功能的互作網路。將 VHH/奈米抗體應用於您的研究,能使專案邁向新層次,並使您得以提出過去無法回答的新問題,進而以實驗方式加以探究。

VHHs 通常優於 IgGs 的關鍵應用範例

  • 串聯應用:可提升結合強度,或同時針對兩種不同抗原。這類雙特異性或雙價奈米抗體可在原核生物中表現並加以純化。
  • 可靈活調節在體內的循環時間。VHH 會經由腎臟迅速自血液循環中清除。可透過將 VHH 耦合至 Fc 區域以延長其循環時間。其他替代方包含 PEG 化處理,或將 VHH 耦合至具白蛋白結合能力的 VHH。
  • 診斷/生物感測器:將 VHH 定向固定於載體,可提升重現性並提高靈敏度。
  • 重組 VHH-報導酵素組合元件:將原始 VHH 直接與報導酵素結合。可於哺乳動物細胞中高效表達融合蛋白,且無需輔助抗體。
  • 細胞內抗體:透過轉染帶有靶向序列的抗原專一性 VHH,可改變蛋白質在細胞內的定位,例如:導向粒線體外膜(MOM,圖中為綠色)。此時,抗原將被引導至粒線體(紅色),並與 VHH 共定位(黃色,右圖),同時也證明 VHH 在細胞質中具有功能。此外,奈米抗體亦可用於干擾目標蛋白質的生物活性,或其與其他蛋白質或 DNA(如:轉錄因子)之間的交互作用。
  • 基因治療:由於 VHH 體積小(約 0.36 kb),可輕鬆將多個相同或不同的 VHH 基因置入病毒基因組中。
  • 奈米抗體衍生化:透過疊氮基苯丙胺酸,可將多種不同化合物以位點特異的方式接合至 VHH

奈米抗體優勢總覽:

  • 體積僅為 IgG 的十分之一。
  • 擁有較長的 CDR 區,可在體內與體外有效阻斷酵素活性或干擾蛋白質間的互作。
  • 是蛋白質體學研究的強大工具。
  • 結構蛋白常缺乏有效抑制劑,奈米抗體正好填補此空缺。
  • 能細緻地抑制蛋白功能,而非像 RNAi 一樣將目標蛋白質完全破壞。
  • 更深入了解您的目標蛋白質的生物學特性。
  • 奈米抗體在細胞質(還原性環境)中具高度穩定性。
  • 奈米抗體 cDNA 皆可取得,隨時可用。
  • 可避免 GFP 融合蛋白的過度表達,進而維持蛋白質體內平衡。
  • 作為細胞內抗體使用時,可直接作用於內源性蛋白質。
  • 高親和力結合劑(nanomolar 至 picomolar 等級)。
  • 仍可對目標蛋白質進行成像(RNAi 無法達成)。
  • 可在其一級結構中插入非天然胺基酸,實現位點特異性修飾。
  • 可將螢光團特定位點耦聯至奈米抗體,實現極低連結誤差,適用於超解析顯微技術。
  • 可將奈米抗體以共價方式連接至螢光團、磁珠、金奈米粒子、生物分子或藥物。
  • 奈米抗體有助於蛋白質晶體化。
  • 可識別目標蛋白質中的關鍵表位。
  • 作為「不可藥物化」蛋白質的治療切入點。